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【分享】德国Nordmark助力TILs细胞疗法从肿瘤组织中提取TILs的GMP级胶原酶方案
发布时间:2023/12/11 点击数:

前言

TILs(Tumor Infiltrating Lymphocytes,肿瘤浸润淋巴细胞)是从肿瘤组织中分离出的浸润淋巴细胞。TILs细胞疗法是指从肿瘤组织中分离肿瘤浸润的淋巴细胞,在体外培养和大量扩增后回输到病人体内的疗法。TILs细胞疗法有力杀伤肿瘤细胞的关键在于从肿瘤组织中获得高活性、高质量的TILs。


从肿瘤组织中分离TILs的方法有机械分离法、酶消化法等,胶原酶是酶消化法中常用的蛋白酶。在本文中小编将向各位小伙伴介绍胶原酶消化法在TILs研究中的应用,并推荐德国Nordmark制造的可在临床上应用的GMP等级胶原酶。



一、Nordmark 胶原酶简介

Nordmark 提供从科研级到临床应用的GMP级胶原酶产品,NB6 GMP级在药物研发和临床试验中得到广fan应用,早在2009年,ChondroCelect成为欧洲shou个ATMP(Advanced Therapy Medicinal Products)药物,而该产品中使用的胶原酶正是Nordmark的Collagenase NB 6 GMP Grade胶原酶。目前已有60+使用Nordmark胶原酶的ATMP研究项目已经在临床阶段,其中21项目是有关TILs研究。


二、应用案例

以头颈癌为例,向各位小伙伴分享胶原酶在TILs提取和分离中应用案例。

1、获取新鲜的头颈癌手术切除组织;

2、用适量体积缓冲溶液清洗组织块表面的血液等;

3、将肿瘤组织剪碎成1~2mm3的组织块;

4、离心收集组织块;

5、用适量体积缓冲溶液清洗剪碎的组织块,重复3次;

6、用适量的胶原酶溶液(1mg/ml)重悬剪碎的组织块;

7、37℃孵育30min;

8、添加足量预冷的缓冲溶液,混匀后离心并收集细胞;

9、用适量体积缓冲溶液重悬细胞,100μm过滤器过滤收集单细胞;

10、CD3、CD4、CD45等表面Marker染色;4℃孵育30min;

11、流式细胞仪分析、筛选,收集目标细胞;

12、TILs培养或冻存。


更多关于Nordmark胶原酶在TILs领域的应用请联系上海曼博生物

1、超过25年的高质量胶原酶专业供应,按照制药级标准进行纯化和生产;

2、组织细胞解离的整体解决方案:按照不同种属、组织/器官、细胞类型进行分类:

    1) 不同规格,纯度,活性的胶原酶以及中性水解酶;

    2) 从科研级到GMP等级以及无动物源级别多重选择,相关GMP产品已在FDA备案DMF;

    3) 满足绝大多数组织/器官的单细胞解离需求,包括提供敏感细胞解离专用的温和解离酶方案。

3、用户使用友好提供优化过的细胞解离Protocol;

4、供配套的胶原酶残留检测方案敏感细胞解离专用的温和解离酶方案。



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